（附应对策略与行业影响前瞻）
2023年《中国药典》高效液相色谱法（HPLC）通则（0512）完成二次修订，并且至今未再有三次修订公示，由此推断25版药典是采用二次修订内容。
此次调整聚焦方法学严谨性、参数标准化及操作实用性，旨在提升药品质量分析的精准度与可靠性。本文结合最新公示稿，系统梳理关键修订内容，解读其对制药行业的影响，并提出落地建议。
一、修订背景与目标
25版药典HPLC通则的修订基于两大驱动因素👇
国际接轨需求：参考USP、EP等国际药典最新版色谱法标准，强化参数定义与计算方法的科学性；
行业反馈优化：针对2020版实施中暴露的实操痛点（如系统适用性判定模糊、梯度分离条件不明确等）进行补充完善。
二、核心修订内容解读
1. 色谱参数调整范围的精细化
流速允许范围扩展：二次修订明确流速可调整范围为±50%（首次公示稿为±30%），兼顾方法开发灵活性与色谱柱保护需求。
梯度分离条件补充：新增“带留体积对梯度分离影响”描述，要求方法开发时需评估延迟体积对峰形、保留时间的影响，避免方法转移失败。
2. 系统适用性试验（SST）的全面升级
分离度（Rs）计算标准化
修订公式为图片，原公式为全峰宽计算，以半高峰宽替代基线峰宽，更真实反映色谱柱分离效能。
新增峰谷比（p/v）参数
定义图片，用于评估相邻峰的分离程度，尤其适用于复杂基质（如中药多组分）分析。
灵敏度要求重构
信噪比（S/N）计算公式调整为图片（H为峰高，h为基线噪声峰峰值），替代旧版基于RMS噪声的计算方式，与ICH Q2(R1)要求一致。
拖尾因子（T）与重复性要求
差异化调整拖尾因子（T值），峰面积定量放宽至0.8～1.8，峰高定量维持原标准0.95～1.05。
重复性标准提升，要求6次进样的保留时间RSD≤1.0%（原为1.5%），峰面积RSD≤2.0%（原为3.0%）。
3. 测定法与操作规范的完善
校准曲线测定法新增：明确需通过多点校准验证线性范围，要求相关系数（r）≥0.999，截距相对响应值≤2%，强化定量分析准确性。
复杂体系对照图谱要求：对于多组分样品（如复方制剂），允许在品种项下附对照图谱，通过直观比对评价系统适用性，减少主观判定误差。
三、对制药行业的关键影响
1. 方法开发与验证成本增加
方法转移挑战：梯度分离条件中带留体积的评估需额外实验，企业需升级设备（如配置自动延迟体积测定模块）；
验证复杂度提升：峰谷比、拖尾因子等新参数的引入，要求企业在方法验证中增加检测项，延长研发周期。
2. 质量控制体系升级压力
数据完整性风险：半高峰宽、信噪比等计算方式变更，需同步更新LIMS系统算法，避免人工计算误差；
人员培训缺口：检验人员需掌握新参数定义与判定标准，尤其是p/v、S/N的实操应用。
3. 合规性风险点
历史方法合规性：已注册方法若未涵盖新参数（如峰谷比），可能需补充研究或重新申报；
审计应对难度：监管检查将重点关注系统适用性试验的执行细节，如半高峰宽测量是否规范、校准曲线截距是否符合要求。
四、企业应对策略建议
1. 技术层面
设备与软件升级
配置自动计算半高峰宽、峰谷比的色谱工作站，确保数据采集与处理符合新规；
方法再验证
对现有HPLC方法开展差距分析，重点评估分离度公式、拖尾因子计算等变更影响，必要时启动补充验证。
2. 质量管理层面
SOP修订与培训
更新检验操作规程，纳入p/v、校准曲线截距等新要求，组织全员培训并考核；
审计模拟演练
针对系统适用性试验、数据完整性等高风险环节，开展内部模拟检查，提前识别整改项。
3. 研发与注册层面
申报策略优化
新药方法开发直接采用25版标准，避免后续变更；已上市品种需评估历史数据兼容性，制定分阶段升级计划；
技术文件更新
在稳定性研究、方法转移报告中补充带留体积评估、对照图谱等新要求内容。
五、行业趋势前瞻
智能化分析工具普及：AI驱动的峰识别、噪声计算软件将成标配，降低人工判读主观性；
低流速、高柱效方法推动溶剂消耗减少，契合药典节能减排导向；
监管协同强化：药典与GMP检查联动，对色谱数据完整性（如审计追踪、电子签名）的要求趋同。
结语
25版药典HPLC通则的修订，标志着我国药品质量控制从“合规达标”向“科学精准”的跨越。企业需以此次调整为抓手，重构分析方法体系，将参数科学性、数据可靠性内化为核心竞争力，方能在全球药品质量竞争中占据先机。